刘子博, 田瑶, 陶婷, 叶洵, 魏大能, 吴纯洁
目的:探究熊胆粉对3-硝基苯磺酸(3-nitrobenzenesulfonic acid,TNBS)诱导大鼠实验性结肠炎的治疗作用,结合网络药理学和分子对接的方法,预测熊胆粉治疗炎症性肠病的药效物质、作用靶点和潜在通路。方法:将大鼠随机分正常组,模型组,阳性药组,熊胆粉高,中,低组。利用TNBS灌肠诱导大鼠实验性结肠炎,评估疾病活动指数(disease activity index,DAI)分数,测量结肠长度和病理改变,ELISA法测定结肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10炎症因子含量,然后通过UPLC-Q Exactive Orbitrap-MS/MS分析熊胆粉成分,利用相关数据库,预测其可能的信号通路,并对二者的亲和力进行预测。结果:与模型组相比,熊胆粉各剂量组DAI分数显著降低(P<0.01),结肠长度不同程度增加,低剂量组更为显著(P<0.05);结肠组织的炎性细胞浸润减少,黏膜上皮基本完整,腺体排列较规则。检测相关炎症因子,与模型组相比,熊胆粉低剂量组TNF-α含量显著下降(P<0.05),IL-10含量显著上升(P<0.01),熊胆粉各剂量组IL-1β、IL-6含量显著下降(P<0.05)。网络药理学和分子对接结果表明胆红素可能是熊胆粉治疗IBD的重要成分;PIK3CA、AKT1、MAPK1、MAPK14、MAPK3是治疗疾病的重要靶点;PI3K-Akt信号通路、FoxO信号通路、MAPK信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制剂抗性、HIF-1信号通路则是治疗疾病的重要信号通路。结论:熊胆粉能减轻TNBS诱导SD大鼠实验性结肠炎,其中胆红素可能为熊胆粉治疗IBD的关键成分,其作用机制可能与抑制炎症、诱导肠黏膜自噬、肠道免疫相关。